(1)猪回肠氨基酸消化率的测定由于大肠微生物的干扰很大,测量值相对较高(约10%),因此采用回肠末端的食糜收集方法确定回肠氨基酸的消化率. 由于从消化道后部排出的氨基酸对人体没有任何价值(Rerat,1978),因此必须确定回肠中的氨基酸. 当氨基酸流入结肠时,这需要外科瘘管收集所有消化液或消化液样本. 在这种方法中,将一个瘘管安装在回肠后,然后将另一个瘘管放置在回肠末端以收集测得的反流消化液样本. 有瘘管的动物被关在笼子里,每天24小时收集. 从30分钟至120分钟收集的消化液样本中测量总排泄量. 通过在回肠末端收集食糜的主要方法是: T型管,桥瘘,回肠直肠联合技术以及可动(可操作)回盲肠瘘. 每种方法的测量值之间没有太大差异,氨基酸分析的误差较大,因此很难说哪种方法最准确. 目前,主要是看哪种方法最方便,包括采样程序和对猪的影响. 相对来说,直肠吻合术比较好. (2)移动尼龙袋法Sauer等. (1989年)发明了一种使用半隔离移动尼龙袋法测量某些饲料的能量和粗蛋白消化率的方法. 方法是: 将约1克测试样品放入120目小的尼龙袋中. 酸性胃蛋白酶处理4小时后,十二指肠瘘进入测试猪的消化道,然后从粪便中收集尼龙袋. 消化酶进入尼龙袋,消化的氨基酸从尼龙袋中释放出来,消化环境与体内条件完全一致.
但是,这种半隔离方法仍然需要存活的动物,而不是真正的体外测试方法. 另外,尼龙袋在动物消化道中的保留时间有很大不同,并且难以控制,这常常导致实验的可重复性差. (2)家禽氨基酸消化率的测定家禽饲料氨基酸消化率的测定相对简单,因为家禽的大肠短,主要是盲肠. 为了减少盲肠的影响,可以去除盲肠. 关于盲肠切除术存在争议. 氨基酸测量值的较大误差将不可避免地影响饲料中氨基酸消化率测量值的准确性. 一项测试中测得的值很难准确可靠,通常取平均值是合理的. 2.确定氨基酸的真实消化率通过上述方法测定的饲料氨基酸的消化率是指表观消化率. 为了准确确定饲料氨基酸的真实消化率,有必要正确评估动物的内源性氨基酸排泄. 主要的评估方法是: (1)无氮饮食法和回归外推法经典方法是Mitchell(1924)建立的无蛋白质(氮)饮食法. 假设动物进食不含任何蛋白质的饮食后,进入食糜或粪便的蛋白质和氨基酸是内源性的,并且在不同饮食条件下动物的内源性氨基酸排泄和氨基酸组成相同或类似. Low(1979)指出,食用无氮饮食后,动物改变了动物的新陈代谢并影响了内源氨基酸的排泄. Ozimek等. (1985)发现动物饲喂无氮饮食后,分泌的消化酶减少,分泌蛋白质的质量也下降.
由于无氮饲料会影响动物消化道的分泌和吸收,因此人们普遍认为无氮饲料会低估猪的内源性氨基酸排泄,即高估了饲料的真实氨基酸消化率. 卡尔森等. (1970)发明了一种回归外推法来估计内源性氨基酸排泄量. 该方法的要点: 以不同蛋白质水平的日粮喂养猪,分别测量粪便或食糜中的氨基酸含量,然后在膳食蛋白质水平为零时使用数学统计法计算粪便或食糜中的氨基酸内源性氨基酸. 尽管此方法考虑了日粮蛋白质含量对内源氨基酸排泄的影响,但与无氮饮食法一样,在计算饲料氨基酸的真实消化率时,仍会从不同的饲料中扣除相同量的内源氨基酸. 问题. (2)酪蛋白的酶促水解/超滤Moughan等. (1990)提出了一种酪蛋白/超滤酶水解的新方法,以估计动物的内源性氨基酸排泄. 原理: 用含酶酪蛋白(分子量小于8.25×10-21g)的半均质饲料喂养动物,然后在回肠末端收集回肠,立即离心和超滤,等等. 大分子蛋白质(分子分子量大于1.65×10-20g的小分子蛋白质(分子量小于1.65×10-20g的小分子)被快速分离. 大分子量蛋白质是内源性的,而饮食吸收部分则没有小分子量蛋白质. 当然,内源蛋白也可以水解成小分子蛋白,但是比例很小,可以忽略不计.
Butts等. (1991)将该方法用于生长大鼠内源性氨基酸排泄的测量. 测量值高于无氮饮食法,与15N同位素标记法的结果相当. 结果表明,该方法在评估动物内源性氨基酸排泄方有相当高的准确性. (3)15N同位素标记法目前认为15N同位素标记技术是直接测量内源氨基酸排泄的最有效方法,可用于确定饮食组成变化对内源氨基酸排泄的影响. 15N同位素标记技术可以通过两种方式进行: 一种是标记饲料蛋白;另一种是标记饲料蛋白. 另一种是标记动物的氨基酸库,即内源氨基酸. 这样,大多数15N同位素用于标记动物氨基酸库,即15N同位素用于连续静脉内输注(或稀释). 粪便或食糜中的内源性氨基酸可以通过同位素稀释来计算. (4)高精氨酸法Souffrant(1991),Schultz等. (1991)和Nyachoti等. (1997)提出了用高精氨酸标记日粮蛋白中赖氨酸的方法来测量内源性氮排泄. 其工作原理是: 在一定条件下,饲料蛋白中的赖氨酸与甲基异脲反应生成高精氨酸. 当高精氨酸被吸收时,在肝脏精氨酸酶的作用下,它可以快速转化为赖氨酸,并同时释放尿素. 高精氨酸不构成内源氮,因此消化道分离细胞和分泌的消化液不包含高精氨酸,回肠食糜中的高精氨酸是一种不被饲料吸收和吸收的外源蛋白质.
动物对鸟苷化饮食蛋白和天然蛋白具有相同的蛋白酶分解和吸收能力. 过去反刍动物饲料蛋白质评估系统: 近年来的CPr,DCPr,TPr: 日粮氮降解率,可代谢蛋白(1)日粮氮降解率1.体内降解率的确定需要确定日粮氮的摄入量(FIN ),内源氮(EN),饮食来源的非氨氮(NAN)和微生物氮(MIN). 这样,膳食氮的降解率(Dy)可以用以下公式表示: Dy = 1-NAN? (最小?EN)FIN2. 用瘤胃尼龙袋法测定氮的降解率. 将饲料喂入人造纤维袋中,然后将其悬浮在瘤胃中. 在一定时间后,比较放入瘤胃中之前和之后氮含量的变化. 降解率(%)=瘤胃中的瘤胃中是否含有氮?瘤胃前从胃中摄取氮. x×100后的氮含量(2)有效的瘤胃可降解蛋白(ERDP)代谢蛋白(MP). 复习问题1.评价饲料的营养价值的目的是什么? 2.简要描述营养成分分析的测量指标和方法? 3.简要描述消化测试的基本要求? 4.评估氨基酸有效性的主要方法是什么,其特征是什么? 5.评价单胃动物蛋白质营养价值的指标是什么?谢谢!
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咱们啥时候也能这么霸气一回