
单纯疱疹病毒性肺炎应该做哪些检查?
可以从气管支气管分泌物,支气管肺泡灌洗液和肺组织中获得HSV病毒. 应尽早使用纤维支气管镜收集标本. 经皮细针穿刺肺活检和开胸不是很有帮助. 皮肤和粘膜损伤的囊泡液中病毒的最高分离率是80%至98%,溃疡sc和愈合的分离率降低(<25%). 标本的收集和运输在病毒分离过程中非常重要. 应尽快收集标本,因为降低了疾病发展后分离病毒的可能性. 标本采集后立即接种可能具有更高的病毒分离率. 必须注意标本的运输和储存条件. 在正式测试之前,样品无法在-20°C的冰箱中冷冻;标本在运输过程中可以在4°C下保存48小时.

应从两个方面评估HSV感染的实验室诊断: 首先,确定患者是否正在散发病毒以及是否存在用于主动抗病毒治疗的HSV感染. 其次,在疑似患者的病毒再激活的临床症状出现之前,确定患者的血清抗体是否阳性,以检查他们过去是否曾感染过HSV,以确定在骨髓移植之前是否有必要进行预防性抗病毒治疗,器官移植和诱导化疗.
1. 细胞培养组织培养是最敏感,最具体的诊断方法,也可用于病毒分型. 高滴度病毒样品可在24至48小时内获得阳性结果,接种后72小时内90%的培养基可产生特征性的细胞病变作用. 7天后可以看到滴度低的样品. 但是,由于标本的收集和传递不当以及使用抗病毒药物时出现假阴性的可能性,组织培养并不总是能够确定病毒的存在.

2. 检测病毒
(1)Papanicolaou(Pap)或Tzank检验: 这是一种快速而廉价的细胞诊断方法,首先对病变的刮擦细胞进行染色疱疹病毒检查,可以在20分钟内显示出细胞变化,即形成多核巨细胞和空细胞质气泡样变化和包涵体. 阳性涂片结果是可靠的,但不能区分水痘带状疱疹病毒(VZV)和HSV-1或HSV-2. 阴性涂片不能排除疱疹病毒感染. 理想情况下,Tzanck涂片阳性率约为50%,灵敏度和特异性低,并依赖于检测器的经验. 由于许多技术和实践原因,应用受到限制.

(2)单克隆抗体的间接免疫荧光染色: 用于病变刮擦检查,灵敏度为78%至88%,假阳性很少见. 直接电子显微镜很有吸引力,因为它可以在2小时内完成,但灵敏度可变,特异性低. 酶联免疫吸附测定法用于检测单纯疱疹病毒. 灵敏度可达95%,特异性高. 但是,如果样本在收集后没有立即检查,其灵敏度会降低. 放射免疫测定法也用于检查单纯疱疹病毒. 荧光素标记的抗体检测,间接免疫过氧化物酶检测或使用单克隆抗体的酶免疫测定等. 这些方法便宜,快速,并且不需要细胞培养技术. 最近生产的单克隆抗体离心技术用于荧光素标记的抗体直接染色是快速而灵敏的,但它更常用于巨细胞病毒的诊断. 免疫荧光法直接检测HSV抗原特异性高,但灵敏度低,取决于标本的质量.
用培养扩增技术和直接检测技术检测肝炎病毒抗原的酶免疫测定(EIA)结果表明: 肝炎病毒EIA对各种来源的标本具有高度敏感性(93.7%)和高度特异性(96.6%);方法简单,可重现和快速(4小时). 当样品被细菌污染时,结果会受到影响. 已治愈或正在接受抗病毒治疗的患者的结果不可靠. 气管支气管标本和下呼吸道分泌物的病毒培养通常需要2至5天才能得出阳性结果,而要确定阴性结果则需要2周.

(3)DNA探针技术的应用: DNA探针有助于诊断HSV感染. 当细胞形态可疑时,DNA探针可以确认诊断. 有几种因素可能会混淆形态学诊断: ①HSV包涵体与巨细胞病毒(CMV)和腺病毒相似. ②当发生HSV和CMV双重感染时. ③除HSV外,其他呼吸道病毒也可产生多核细胞. 原位能够定位特殊的病毒基因组序列,比传统的测定方法更简单,更快捷.
(4)聚合酶链反应(PCR): 即使在石蜡结果相似. PCR没有Tzanck涂片和病毒培养的许多技术和实践限制. PCR在快速诊断可疑HSV病毒感染的免疫抑制患者中具有优势.
3. 血清学检查该方法的最大价值是证明患者已感染HSV,并且血液循环中的抗HSV抗体可能是重复感染的迹象. 抗体效价提高4倍或更多表明最近感染了HSV. HSV抗体可以通过多种方法检测,包括补体结合试验,微中和试验和酶免疫法. 这些方法是高度敏感和可靠的,但是血清学检查不能区分内源性病毒感染和再感染. 血清学检查结果无诊断意义,不利于快速诊断. 另一个问题是HSV-1和HSV的交叉反应,因此无法确定急性HSV感染的血清分型. 只有在急性期血清中没有HSV抗体时,才可以使用血清学检查来诊断HSV的初始感染. 在这种情况下,如果抗体在恢复阶段出现在血清中,则可以称为血清转化. HSV肺炎不会增加抗体滴度,通常预后不良,该病毒易于广泛传播.
4. 病毒分型单纯疱疹病毒分型有三种常用方法. 首先,采用标准的核酸内切酶切割并通过琼脂糖凝胶电泳分离. HSV-1和HSV-2的DNA类型不同,因此很容易区分HSV-1和HSV-2. 第二种方法是用荧光素标记的特异性单克隆抗体对病毒进行基因分型. 该方法具有快速直接检测切片和培养基的优点. 第三种方法是使用5-溴乙烯基脱氧尿苷(BrdU),它只能通过在细胞培养基中保持适当的浓度来阻止HSV-1的复制. HSV血清分型对流行病学很重要,除了HSV生殖道感染和HSV脑炎外,临床医生很少需要此信息.
对于非致命的HSV感染,可以进行病毒培养的实验室测试,因为这种感染在临床上通常是可以识别的,并且可以在提取标本后的几天内获得病毒确认. 对于致命的HSV感染,需要立即进行抗病毒治疗,因此必须快速,准确地诊断HSV感染. 最好的方法是免疫荧光染色. 重度HSV感染患者的早期抗病毒治疗预后较好. 尽管可以在确诊之前进行抗病毒治疗,但是快速的阳性检测结果可以提示医生尽快开始抗病毒治疗. 严重HSV感染的新生儿患者可能仅具有皮肤损伤作为HSV感染的证据. 快速诊断测试尤其重要. 如果延迟诊断和治疗,感染的其他部分将很快扩散,预后将大大恶化. 在无症状的HSV感染患者中,不可能过分强调快速HSV诊断测试.
X射线胸片很难与其他肺部感染区分开. 它可以显示局部,多次或弥漫性间质浸润. 在早期阶段,随着疾病的进展,可能会出现典型的肺门或弥漫性间质密度增加,支气管壁增厚以及不规则的肺泡堆积. 单纯疱疹病毒气管支气管炎的胸部X线片正常.
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